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禽腺病毒的流行现状及防控措施

作者:pinnacle平博pinnacle平博网站禽苗技术部 程祥琴 孙海龙浏览次数: 日期:2018-09-28 17:38:06
        禽腺病毒是家禽常见的感染病原体,大部分腺病毒可在健康禽类体内复制,很少或不表现明显的感染症状。有些腺病毒为条件性病原,然而有些腺病毒(如火鸡出血性肠炎病毒,鹌鹑支气管炎病毒和产蛋下降综合征病毒)本身就是原发病原,其他一些腺病毒与某些特异性疾病有关。一些文献将大部分从鸡、火鸡和鹅分离到的腺病毒成为Ⅰ亚群腺病毒。         2014年以来,在我国很多地区分离到Ⅰ亚群禽腺病毒,临床主要表现为包涵体肝炎和心包积水综合征,各品种家禽都有感染的病例报道,给家禽养殖业带来巨大的经济损失。                                           (图1)禽腺病毒病阳性的省份 1.病原情况:         Ⅰ亚群腺病毒组成了腺病毒科的禽腺病毒属。Ⅱ亚群(火鸡出血性肠炎和相关病毒)和Ⅲ亚群(产蛋下降综合征)病毒和疾病的相关性明确,相比之下,大多数的Ⅰ亚群腺病毒对禽类的致病作用还未完全确定。只有引起鹌鹑支气管炎的FADV-1株和在心包积液综合征病因学起主要作用的FADV-4株相对显著。此外,当鸡的健康受到损害,通过其他病原感染,如鸡贫血因子病毒和传染性法氏囊病病毒时很容易出现其他腺病毒的条件性感染。         利用限制内切酶(RE)分析可将已知的12个血清型分为A(血清 1 型)、 B(血清 5 型)、 C(血清 410 型)、D(血清 23911 型)、 E(血清 678a8b 型)等 12 个血清型 。目前常用PCR鉴定种内血清型。         禽腺病毒没有囊膜,由12个五邻体构成二十面体顶角壳粒,五邻体由2条纤突组成。病毒颗粒直径7090nm,呈20面体对称结构,双股DNA。除FAdV-1病毒可凝集大鼠红细胞和绵羊红细胞外,其他血清型没有血凝作用;病毒颗粒在细胞核中堆积,形成晶状结构即包涵体。用细胞化学或免疫染色的方法在感染鸡组织或细胞培养物上可以清楚观察到包涵体,可用于禽腺病毒病的诊断。         由于没有囊膜,所以禽腺病毒对外界环境抵抗力比较强,对乙醚、氯仿、胰蛋白酶、酚和乙酸均有抵抗力,可耐受PH3~9,在1:1000浓度甲醛中可被灭活,本病毒对碘制剂、次氯酸钠和戊二醛敏感。 2、禽腺病毒的致病性         由于Ⅰ亚群腺病毒作为原发病原的作用尚未搞清楚,不同的血清型,甚至相同血清型的不同毒株,在造成发病和死亡/或者引发呼吸道疾病的能力也有所不同。         与传染性法氏囊疾病共同感染可增强禽腺病毒的致病性,共同感染鸡贫血病毒时可大大增强禽腺病毒引起肝炎和致死能力。 3、发病机理和流行病学         Ⅰ亚群禽腺病毒呈世界性分布。除可感染各年龄阶段的家禽外,亦在其他品种的禽类如火鸡、鸽子、鹅、番鸭、澳洲长尾鹦鹉和一种野鸭中都分离到了Ⅰ亚群禽腺病毒。毒力与毒株、鸡的日龄和感染滴度有关,最小致死量的范围在4300000 TCID50 (病毒半数组织细胞感染量)以上。         流行病学调查结果显示水平传播为主要传染方式。感染鸡排毒期长达5~9周。230周龄均可发病,发病日龄主要集中在2060日龄,最早可见7日龄的雏鸡发病,晚至400日龄以上的产蛋鸡也有发病;发病日龄越早,死淘率越高。         腺病毒自然感染的潜伏期较短(24~48小时)临床表现为突然死亡。一年四季均有发病,58月份为高发季节。 4、传播方式和媒介         (1)垂直传播   蛋鸡潜伏感染后,因产蛋应激,高水平的性激素再激活了病毒,导致通过种蛋病毒传给下一代。         2016年山东农业大学动物医学院实验室从32批弱毒活pinnacle平博官网中的一支LaSotapinnacle平博官网中分离到了FAdV-4         (2)水平传播    病毒可存在于粪便、气管和鼻粘膜以及肾脏中。粪便中病毒含量最高。主要传播途径是通过直接接触粪便和短距离范围内的空气,传播缓慢,持续数周;也可通过种公鸡的精液传播。         (3)感染后1天就能分离到腺病毒,正常情况是在3周后开始排毒。肉鸡排毒高峰是第46周龄,后备鸡在感染后59周排毒量达到高峰。有些病例在感染14周后仍有70%排毒。         (4)一只鸡上可分离到2种以上血清型病毒,血清型之间很少有交叉保护性。 5、临床症状         (1)包涵体肝炎(IBH         特征是3~4天后突然出现死亡高峰,一般第5天停止 .但偶尔也持续23周。发病率低,病鸡呈蜷曲姿势,羽毛粗乱,48小时内死亡或康复,死亡率可达10%,偶尔达到30%。正常情况下,IBH多见于37周龄的肉用鸡,但早至7日龄,晚至20周龄也有发生。         自然暴发的IBH与多个不同的血清型病毒有关,已报道的有FAdV-1FAdV-2FAdV-3FAdV-4FAdV-5FAdV-6FAdV-7FAdV-8FAdV-9FAdV-12         由传染性法氏囊病(IBD)引起的免疫抑制有助于腺病毒诱发IBH。用鸡贫血因子(CIAV)和腺病毒一起感染鸡时,可增加肝炎的发病率和死亡率。         临床上除了发生肝炎外,还会出现胰腺炎、腺胃炎、肌胃炎等症状。         (2)心包积水综合征         2015年开始我国发生以心包积水综合征为主要特征的腺病毒病,心包积水综合征早在 1987年巴基斯坦被发现。大多数的心包积水综合征的典型过程是39周龄多发,出现死亡,一周后有48天的死亡高峰,然后下降。心包积水综合征也发生在种鸡和蛋鸡,死亡率低。临床病例分离毒为FAdV-4病毒,该病能在鸡群水平传播,人是重要的传播媒介。 6、鸡腺病毒感染后的影响         (1)产蛋率和蛋壳质量下降轻微或不下降。         (2)饲料消耗量下降,增重缓慢,易发生脂肪沉积。         (3)呼吸道症状。病毒不是鸡呼吸道疾病的原发病原,腺病毒的存在是呼吸道病的起因。 7、禽腺病毒感染剖检症状及病理变         (1)包涵体肝炎 肝脏苍白、黄色、质脆、肿胀、肝和骨骼肌有出血点和出血斑。法氏囊、胸腺萎缩。包涵体位于肝细胞内,嗜酸性,大而圆,或者不规则,周边有明显的苍白晕,偶尔可见嗜碱性包涵体。                            (图2-3)肝脏苍白、黄色、质脆、出血                    (图4) 法氏囊萎缩,内有黄色干酪样渗出物                 (图5)腿部肌肉出血 (2)心包积水综合征         心包积水综合征病例,心包囊中有淡黄色清凉的积液,肺水肿、肝脏肿胀和变色、肾脏肿大,伴有肾小管变性肿胀。胰腺炎、腺胃炎、肌胃炎。在心脏和肝脏出现多个局灶性坏死区域,伴随单核细胞侵润。在肝细胞中有嗜碱性包涵体。             (图6)心包囊肿有淡黄色清亮的积液             (图7)肾脏肿大,伴有肾小管变性肿胀                           (图8)肺水肿                                      (图9) 腺胃乳头肿胀、肌胃炎               (图10)气管炎症(气管纤毛消失)             (图11)胰腺炎(出血斑、白色坏死班)         通常在一个病例中可以见到以上所有症状,包括包涵体肝炎和心包积水综合征。 8、免疫力         Ⅰ亚群的鸡腺病毒具有共同的特异性抗原,但不同血清型共同抗原的相同程度有差异。例如FAdV-1病毒对本身的抗血清呈强反应,但FAdV-1抗原不能检查出FAdV-2FAdV-4的抗体。         禽类感染后迅速产生中和抗体(型特异性),1周后可检查出来,3周后滴度达到高峰。禽类感染后,用双向免疫扩散(DID)试验可检测出群特异性抗体,但通常为一过性。抗体的检测与所用的方法的敏感性有关。也可用间接免疫荧试验抗体检测。         禽类感染后8~9周后可能会被同一血清型病毒再次感染。         某些腺病毒毒株感染可引起法氏囊、胸腺和脾脏中的淋巴细胞严重缺失,导致免疫抑制。 9、诊断方法         (1)根据临床及剖检症状         (2)实验室诊断         根据病理变化:敏感单层细胞和组织切片进行H.E染色,检查核内嗜碱性包涵体,可作为有DNA病毒感染的一种非特异性指征。                     (图12AB肝脏的组织病理学检查,肝细胞可见包涵体。         鸡胚肝细胞和鸡肾细胞培养,将分离毒与所有已知血清型进行病毒中和试验可以鉴定血清型。         将送检病料进行鸡胚接种,提取DNA,利用腺病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群分群引物和Ⅰ群腺病毒分型引物(FAV1-12)进行RT-PCR扩增,如图所示,均能得到禽腺病毒目的条带。          (图13)心包积液综合征电泳结果         近年分离到的FADV测序结果如下:  (图14)腺病毒Hexon基因遗传进化分析 [1]         从分群角度对分离株进行规整可以看到新分离的禽腺病毒毒株都属于Ⅰ群禽腺病毒,但是它们的血清型和基因型并不相同,通过对分离株基因型和血清型分析如下:         对Ⅰ亚群的禽腺病毒进行血清型和基因型分析,发现我国主要流行ABC三种基因型,共6个血清型(火鸡1型、1型、4型、5型、8a/b型),但是近期在豫南、皖北、苏北、鲁西北和胶东地区流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/b型,造成鸡群的死亡率较高,发病急,有蔓延的趋势。         (3)鉴别诊断         临床诊断时注意与腺胃炎、肌胃炎以及非典型性法氏囊炎病的区别。禽腺病毒病与法氏囊病的发病日龄、发病季节相似,所以要特别注意禽腺病毒病与法氏囊病之间的区别。两种疾病的主要区别如下表               禽腺病毒病与法氏囊病之间是主要症状对比情况表
  法氏囊病 禽腺病毒病
病原 双股RNA病毒 无囊膜20面体对称 双股DNA 无囊膜20面体对称
主要发病季节及传播方式 5-9月
水平传播
5-9月
垂直传播和水平传播
主要发病日龄 20-60日龄 成年鸡极少发病 20-60日龄  成年鸡亦有发病
发病情况 突然发病,死亡率高,呈现尖峰死亡曲线,病程5-7天,传播快。 突然发病,病程长,2-3周,死亡率低,传播慢。
大致临床症状 精神萎靡,拉白色奶油样稀便,脱水。 急性死亡的无明显临床表现。慢性病表现为精神不振,拉白色石灰样稀便
    剖检症状 1、胸肌、腿肌点状或刷状出血
2、肝脏发黄
3、肌胃、腺胃交界处出血、溃疡
4、法氏囊现肿胀、出血、囊内黏液,后期萎缩。非典型病例法氏囊萎缩,内有粘液或黄白色渗出物。
5、严重花斑肾
6、胸肌和腿肌有出血斑或出血点
1、内脏器官水肿,肺、肠系膜水肿,心包积液
2、肝脏发黄、肿大、出血、坏死
3、肌胃、腺胃交界处出血、溃疡
4、法氏囊萎缩
5、肾脏有尿酸盐轻微沉积
6、常随有腺胃炎、肌胃炎症状
7、胸肌和腿肌少量出血斑点
10、防控措施         管理措施         (1)因为IBDCIAV都能增强腺病毒的致病性,因此要注意消除这两种病毒。         (2)控制种鸡的腺病毒病,预防垂直传播。         (3)鸡场免疫选用SPF胚制作的活pinnacle平博官网,杜绝pinnacle平博官网污染。         (4)加强消毒管理,控制水平传播。(因为腺病毒抵抗力较强,因此要选用敏感高效消毒剂:醛类消毒剂)         治疗方案         使用正规厂家生产的精制卵黄抗体,起效快,方便实用是控制腺病毒的首选。         pinnacle平博官网免疫         目前我国还没有正式的pinnacle平博官网上市,部分厂家的禽腺病毒Ⅰ群4型灭活pinnacle平博官网苗获得临床试验批件,其中包括全病毒灭活pinnacle平博官网和基因工程灭活pinnacle平博官网。         全病毒pinnacle平博官网:采用悬浮培养工艺,将禽腺病毒在鸡肝细胞系(LMH细胞)上增殖,收获病毒液,经甲醛灭活后加入矿物油佐剂混合乳化制成。         基因工程亚单位pinnacle平博官网:pinnacle平博pinnacle平博网站的新流法腺(N7a株+SZ+rVP2蛋白+Fiber-2蛋白)基因工程亚单位四联灭活pinnacle平博官网和新流腺(N7a+SZ+Fiber-2蛋白)基因工程亚单位三联灭活pinnacle平博官网于2017年取得临床试验批件。         近两年的临床试验表明,腺病毒基因工程亚单位pinnacle平博官网(Fiber-2蛋白)在预防心包积水综合征和IBH中起到了显著的作用。基因工程亚单位Fiber-2 蛋白系列灭活pinnacle平博官网免疫,采用基因工程技术,高效表达目的蛋白,抗原效价高,接种机体后既可以诱导细胞免疫又可以诱导体液免疫,免疫效果更好,免疫应激更小。         参考文献         1、牛登云、沈元、尤永君等 2015年我国Ⅰ群腺病毒分子流行病学调查。中国家禽2016年第38卷第9期。
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